复方多粘菌素B软膏由硫酸多粘菌素B、硫酸新霉素、杆菌肽、盐酸利多卡因组成，其中硫酸多粘菌素B、硫酸新霉素、杆菌肽都是抗生素。硫酸多粘菌素B为多肽类抗生素，通过干扰细菌膜通透性与核糖体功能而导致细菌死亡，对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、嗜血杆菌等有良好的抗菌作用；硫酸新霉素为氨基糖苷类抗生素，可阻碍细菌核糖体30S亚基相联结的蛋白质合成，引起其遗传密码错读而导致细菌死亡，抗菌谱较广；杆菌肽为多肽类抗生素，通过抑制细菌细胞壁粘肽的合成而导致细菌死亡，主要对革兰氏阳性菌尤其对常见的金黄色葡萄球菌和各种链球菌抗菌活性强，对革兰氏阴性球菌和某些放线菌、螺旋体、阿米巴原虫也有一定的抑制作用。
复方多粘菌素b软膏作为处方药，需要在医生指导下使用。用药前向医生详细描述自己的特殊过敏史、身体状况、基础疾病以及近期用药情况等，排除用药禁忌，避免出现严重用药风险。要避免在大面积烧伤面、肉芽组织或表皮脱落的巨大创面使用本品，也不可在眼内使用。如不慎入眼，应立即用大量清水清洗，若还有明显不适请及时就医。用药期间注意监测药物不良反应，出现任何严重、持续或进展性情况，应及时就医。