制霉菌素片的用量需由医生来决定，医生会根据患者病情、营养状况、耐受程度等因素，决定合适的用药剂量，每个人需要的剂量可能都不一样。通常情况下，由于制霉菌素片不被胃肠道不吸收，基本上全部在肠胃直接起到抗真菌的作用，所以饭前空腹口服制霉菌素片比较好。但是部分患者服药后会出现腹泻、食欲不振、恶心、呕吐、嗳气等胃肠道不适，建议这部分患者饭后再服用本品，以减少药物对胃肠的刺激。
需要注意的是，过多地使用制霉菌素会导致真菌产生耐药性，还会使不敏感菌株大量繁殖，容易引起感染，需要警惕。孕妇要在医生的指导下，谨慎使用制霉菌素片。暂时不明确制霉菌素是否可经乳汁分泌，哺乳期女性使用本品时应暂停哺乳。本品对5岁以下儿童的安全性以及有效性暂时不明确，所以不推荐5岁以下儿童使用制霉菌素片。